Chameleon P16多功能蛋白稳定性分析
产品介绍
多功能蛋白稳定性分析仪是一款无需加入荧光染料、高通量、低样品消耗量检测蛋白质稳定性的设备。该设备基于内源差示扫描荧光技术(intrinsic fluorescence DSF),通过检测温度变化/变形剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光的改变,获得蛋白质的热稳定性(Tm值)、化学稳定性(Cm值)等参数。可应用于蛋白缓冲液条件筛选及优化、小分子与蛋白结合情况的定性测定、蛋白质修饰及改造后的稳定性测定、蛋白变/复性研究、不同批次间蛋白稳定性对比等多个方面。
产品特点
1、仪器无需更换配件,使用时无需预热,无需清洗维护
2、整机为一体化设计,内置仪器控制和数据分析电脑
3、样品管采用高纯度石英材质,紫外透过率高,可检测低浓度的样品
4、一次性耗材样品管,样品不接触仪器内部,无需清洗和维护
5、八联排设计,使用灵活,适配多通道移液器进样
6、可密封式设计,防止实验过程中的样品蒸发
满足多种检测需求
●缓冲液条件优选
●Detergent筛选
●蛋白改造
●Thermal Shift Assay
●AAV血清型鉴定
●蛋白质控
●存储前后对比
●生产批次对比
●等温稳定性
●蛋白变复性
缓冲液/制剂优化
蛋白的制备过程、存储,功能实验,都需要合适的缓冲液条件。通过测试蛋白在不同缓冲液中的Tm值,可以从热稳定性的角度对缓冲液的PH值,盐浓度,添加剂(例如膜蛋白需要的detergent)种类和浓度,制剂辅料等进行快速筛选和优化。
蛋白改造
某些蛋白的天然构象极不稳定,非常不利于体外制备,功能研究,结构解析。因此在不改变蛋白功能的前提下,可以通过对柔性区域的截短,删除或替换,引入点突变等方法增加蛋白稳定性。通过测试不同突变体的Tm值,可以对突变体进行稳定性评估和筛选。
Thermal Shift Assay
TSA实验通量高,样品用量少,广泛用于蛋白与配体,特别是小分子化合物的结合筛选。基于内源荧光的ifDSF方法,无需染料,不限制蛋白类型和缓冲液成分,操作简单,数据易于分析;可用于化合物药物结合筛选,蛋白配体结合验证等。
蛋白质控
无论是自己纯化的蛋白还是商业化购买的蛋白,不同批次之间都可能存在差异。蛋白在存储一段时间之后,和新鲜制备的样品间也可能发生差异。对蛋白进行多次冻融等处理后,也会改变蛋白的性质。通过对比蛋白的热变性曲线,即可对蛋白进行质量比对。
等稳定性
通过将蛋白维持在某个的温度下进行长时间荧光检测,进行加速稳定测试,即可了解蛋白的长期稳定性。样品管进行封闭后,可保证蛋白溶液不会挥发,完成长达数十小时的持续检测。
蛋白变复性
有些蛋白变性之后无法复性;而有些蛋白在特定的缓冲液条件和温度下,发生部分变性之后,随着温度的下降还会复性。研究蛋白的复性缓冲液条件和最高可复性温度,对于深入理解蛋白的稳定性和长期储存条件,具有重要意义。
蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280 nm的紫外光激发并释放出荧光,其荧光性质与所处的微环境密切相关。蛋白变性过程中,色氨酸从疏水的蛋白内部逐渐暴露到溶剂中,荧光释放的峰值也从330 nm逐渐转移到350 nm。
内源差示扫描荧光技术(intrinsic fluorescence DSF),通过检测温度变化/变性剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光(350 nm/330 nm比值)的改变,获得蛋白的热稳定性(Tm值)、化学稳定性(Cm值)等参数。相比传统的方法,无需添加染料,通量高,样品用量少,数据精度高。